NAGLU缺失后，附睾里的“垃圾处理站”出了什么问题？

硫酸乙酰肝素（HS）是细胞表面和基底膜上常见的一类糖胺聚糖，参与细胞间信号、基质结构和屏障功能。细胞把HS连蛋白的复合物吞入后，要在溶酶体中逐步降解；其中α-N-乙酰葡糖胺酶（NAGLU）负责切掉HS寡糖末端的N-乙酰葡糖胺。NAGLU基因突变会导致黏多糖贮积症IIIB型（Sanfilippo B型），一种溶酶体贮积病。此前有报道称Naglu敲除小鼠6月龄起出现雄性不育，但没有结构或功能参数支持。这项研究用7月龄野生型和Naglu敲除小鼠，重点观察睾丸、输出小管和附睾的超微结构。

首先，敲除小鼠附睾和睾丸中NAGLU酶活性显著下降，附睾上皮内HS积累，说明“底物降解不了”确实发生了。睾丸里，生精上皮、Sertoli细胞、生殖细胞和Leydig细胞大体正常，血睾屏障、顶体形成和生精周期也没有明显破坏；但间质巨噬细胞充满淡染的溶酶体，Sertoli细胞偶有较大的淡染溶酶体，小管外周肌样细胞也有类似改变。输出小管则明显异常：非纤毛细胞和纤毛细胞都堆积大量形状不一的淡染溶酶体，部分融合成大而不规则的结构，把Golgi和ER等细胞器挤乱。

附睾是精子成熟的关键场所。敲除小鼠附睾主细胞（principal cells）内出现大量小到中等大小的淡染溶酶体，常填满核上或核下胞质；Golgi堆叠减少、排列松散，部分细胞核形态不规则，caput区还出现异常线粒体与溶酶体接触、融合甚至被溶酶体包裹的迹象。更引人注意的是附睾单核吞噬细胞（eMPs）。这些CD68+/MOMA-2+/CX3CR1+细胞位于上皮基底部，在敲除小鼠中变成巨大、高度空泡化的细胞，胞质几乎被一个或数个巨大淡染溶酶体占据，残余胞质被挤成薄薄的“边缘”和丝状网络，细胞器明显减少，核受压；有些eMPs的膜破裂，内容物释放到侧细胞间隙。eMPs的溶酶体内还出现“斑马小体”——成簇平行排列的扁平膜盘，形态很像主细胞的线粒体嵴，并且对线粒体ATP合酶亚基SCMAS呈阳性，提示eMPs可能正在吞噬退化的主细胞及其线粒体。TUNEL染色在eMPs的溶酶体腔里很强，但核不阳性，也支持它们清除了凋亡上皮的DNA碎片。部分基底细胞也有淡染溶酶体，但有些干细胞样基底细胞似乎未受累。小管间巨噬细胞同样堆积淡染溶酶体，却没有斑马小体，提示不同微环境里吞噬的底物不同。附睾管腔中还可见膜性碎片和致密物，提示上皮退化后溶酶体内容物释放。

总之，NAGLU缺失让附睾上皮细胞和eMPs的“垃圾处理站”超载：HS降解不了，溶酶体越堆越大，挤压细胞器，损害主细胞的分泌/内吞功能，也削弱eMPs的免疫监视和清理能力。这些变化可能影响精子成熟和局部免疫平衡，为Naglu敲除小鼠的不育表型提供了结构解释，也提示HS代谢对男性生育的重要性。需要强调，这是小鼠模型，不能直接推断所有MPS IIIB患者都会出现相同生殖问题，但为后续人群研究提供了方向。